新生牛血清的解冻方法

      瓶装新生牛血清解冻需采用缓慢解冻法：把在-15~-40℃低温冰箱中保存的血清放入4℃冰箱中解冻约1天，待全部解冻后再分装。在解冻过程中每隔约2小时可轻轻摇晃均匀(尽量避免产生气泡)，使温度与成分均一，减少沉淀的发生。切勿直接将血清从-20℃或更低温度进入37℃水浴解冻，这样因温度改变太大，容易造成蛋白质凝集而出现沉淀，从而使用血清的质量下降。

      新生牛血清中的絮状沉淀物主要是解冻后血清中纤维蛋白及4℃长时间保存后血清中的脂蛋白变性造成的，这些絮状物不会影响血清本身的质量，可不用处理。如果必须要处理，可400g离心5分钟去除。但不宜过滤去除，因为絮状物可能阻塞滤膜。

      经过热处理的新生牛血清中沉淀物会显著增多。有些沉淀物在显微镜下观察像“小黑点”，而且由于这些“小黑点”的布朗运动在显微镜下被放大，感觉是在游动，所以经常被误认为血清被微生物污染。通常这些小黑点不会影响细胞生长，但如果怀疑血清存在微生物污染，则应立即停止使用，更换另一批次的血清。可将适量血清用培养液稀释至10%浓度后培养1-3天，观察小黑点是否急剧增多，或取适量血清在LB平板上涂板培养观察是否产生菌落，以确定是否存在微生物污染。

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