血清、血浆、细胞裂解液等生物标本处理

样本存放和稳定性：

样本在2-8度条件下，是可以储藏72h，在-20度或-80度是可以储藏半年以上。样本收集后，并非一次检测完，请按照一次用量分开包装冻存，防止反复冻融。

血清：将收集的康那动物血清分离管的全血标本在室温置放0.5-2小时或4度过夜，随后1000×g离心20min，取上清就可以，或将上清置于-20度或-80度存放，但应尽量避免反复冻融。

血浆：用EDTA或肝素做为抗凝剂采集标本，并把标本在采集后的30分钟内于2-8度1000×g离心15min，取上清就可以检测，或将上清置于-20度或-80度存放，但应尽量避免反复冻融。

组织匀浆：用预冷的PBS(0.01M,pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）添加玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。以便进一步裂解组织细胞，能够对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10min，取上清就可以检测，或将上清置于-20度或-80度存放，但应尽量避免反复冻融。

细胞裂解液：吸弃培养液，用PBS（0.01M，pH7.4）将细胞洗一遍。用细胞刮刮下细胞（不能用胰酶和EDTA处理），添加2-5mLPBS（0.01M，pH7.4）。悬浮细胞可省略。收集细胞悬液，4度1000×g离心10min，弃去培养基，用预冷的PBS润洗3次。加入适量的预冷PBS或非变性细胞裂解液（临用前添加蛋白酶抑制剂）重悬细胞,通常6孔板一个孔的细胞量需要150-250μLPBS重悬。将样品放置-20度或-80度，使样品冷冻，再放室温解冻样品，反复冻融3次，使细胞充分裂解,也可将样品进行超声破碎，从而达到裂解的目的。4度10000×g离心10min，除去细胞碎片，取上清就可以检测，或将上清置于-20度或-80度存放，但应尽量避免反复冻融。

细胞培养物上清或其它生物标本：请1000×g离心20min，取上清就可以检测，或将上清置于-20度或-80度存放，但应尽量避免反复冻融。

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